抗體偶聯(lián)藥物(antibody-drug conjugates，ADCs)是一種新興的靶向治療藥物。它結(jié)合了抗體藥物的特異性與化療藥物的殺傷力，以提供更加精準(zhǔn)且有效的治療方案[1]。傳統(tǒng)的化療藥物雖然具有強大的殺傷力，但由于缺乏特異性，往往會對正常細(xì)胞造成大量的毒性損傷，進而導(dǎo)致患者出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)[2]。相比之下，抗體藥物雖然可以減少對正常細(xì)胞的損傷，但其殺傷力通常弱于化療藥物[3]。ADCs的出現(xiàn)為解決這一矛盾提供了可能性。如圖1所示，ADCs由三部分組成: 裸抗、連接子(linker)和有效載荷(payload)。

ADCs通過其裸抗部分能夠特異性地識別并結(jié)合到腫瘤細(xì)胞表面的抗原，然后被腫瘤細(xì)胞內(nèi)吞形成內(nèi)吞囊泡。隨后，內(nèi)吞囊泡會與溶酶體融合，ADCs發(fā)生降解并釋放出毒性藥物分子，從而促使腫瘤細(xì)胞凋亡[1]; 此外，毒性藥物分子還可能從腫瘤細(xì)胞中釋放出來，進而殺傷周圍的腫瘤細(xì)胞，該過程被稱為“旁觀者”效應(yīng)[4]。由于其獨特的作用機制，ADCs既可以保證療效，又能減少對正常細(xì)胞的損傷。然而，ADCs的研發(fā)并不簡單。首先，裸抗的選擇和生產(chǎn)是一大挑戰(zhàn)，因為裸抗需要具有高度的特異性和親和力，才能精確地識別并結(jié)合到腫瘤細(xì)胞[5]。其次，連接子和有效載荷的設(shè)計及其合成也是一大難題。連接子需要在保證連接穩(wěn)定性的同時，能在合適的條件下釋放有效載荷[6]。而有效載荷則需要具有足夠的殺傷力，且其毒性特性需要與裸抗的靶向性相匹配[6]。此外，ADCs的生產(chǎn)過程繁瑣復(fù)雜，涉及生物技術(shù)和化學(xué)技術(shù)的結(jié)合，質(zhì)量控制難度大[7]。因此，ADCs的藥學(xué)研究是一項重要且復(fù)雜的工作，需要深入研究和探討。本文將詳細(xì)分析和討論ADCs產(chǎn)品的國內(nèi)外上市及臨床申報情況、監(jiān)管現(xiàn)狀以及新藥臨床研究申請(investigational new drug，IND)階段藥學(xué)研究的關(guān)注點，以期為ADCs產(chǎn)品在IND階段的藥學(xué)研究和審評提供參考。

1 ADCs產(chǎn)品國內(nèi)外上市及申報情況

1.1 國內(nèi)外已上市ADCs產(chǎn)品概述

截至目前，全球已有15款A(yù)DCs產(chǎn)品上市(見表1)。通過對這些產(chǎn)品的分析，我們可以清晰地歸納出ADCs產(chǎn)品的發(fā)展歷程。主要分為以下幾個階段: 概念提出期與早期探索(20世紀(jì)初至20世紀(jì)70年代)、第一代ADCs的興起與挑戰(zhàn)(1980—2000年)、第二代ADCs的發(fā)展與成熟(2011—2013年)以及第三代ADCs的創(chuàng)新與突破(2019年至今)。

概念提出期與早期探索(20世紀(jì)初至20世紀(jì)70年代): ADCs的概念并非近年才出現(xiàn)，早在20世紀(jì)初，德國科學(xué)家、諾貝爾醫(yī)學(xué)獎得主PaulEhrlich就已經(jīng)構(gòu)思了ADCs的基本理念，并形象地將其稱為“魔法子彈”[8]。然而，直到20世紀(jì)50年代，ADCs的研究才開始取得實質(zhì)性進展。1958年，Mathe率先實現(xiàn)了鼠抗白細(xì)胞免疫球蛋白與甲氨蝶呤的偶聯(lián)，并將其應(yīng)用于白血病的治療[9]。20世紀(jì)50年代后期至70年代，臨床研究中開始出現(xiàn)偶聯(lián)了有效載荷(如放射性核素、毒素或藥物)的鼠單克隆抗體或多克隆抗體。由于抗體的免疫原性及其制備技術(shù)等一系列挑戰(zhàn)，ADCs的研究進展緩慢，幾十年間幾乎沒有顯著突破。

第一代ADCs的興起與挑戰(zhàn)(1980—2000年): 隨著1975年單克隆抗體的誕生和后續(xù)人源化抗體的出現(xiàn)，ADCs的研究逐漸走上正軌。20世紀(jì)80年代，第一個基于嵌合人源化單克隆抗體的ADC應(yīng)用于癌癥模型研究[1]。2000年，第一代ADCs產(chǎn)品Mylotarg獲得了美國FDA批準(zhǔn)，用于治療急性粒細(xì)胞白血病。然而，由于靶向性、偶聯(lián)技術(shù)和有效性等多個問題，這款藥物在血液中的穩(wěn)定性不佳，毒素小分子容易提前釋放，這導(dǎo)致了嚴(yán)重的毒副反應(yīng)，并最終在2010年被撤市。

第二代ADCs的發(fā)展與成熟(2011—2013年): 盡管面臨困難，科學(xué)家們并未放棄對ADCs的研究。經(jīng)過10余年的努力，2011年，新型ADCs產(chǎn)品Adce tris獲得了美國FDA的批準(zhǔn)，用于治療間變性大細(xì)胞淋巴瘤。2013年，另一款A(yù)DCs產(chǎn)品Kadcyla也獲得了美國FDA的批準(zhǔn)，用于治療HER-2陽性轉(zhuǎn)移性乳腺癌。這2款藥物的成功上市標(biāo)志著第二代ADCs產(chǎn)品的誕生。相比于第一代產(chǎn)品，它們在腫瘤細(xì)胞靶向性、偶聯(lián)技術(shù)穩(wěn)定性以及細(xì)胞毒素小分子有效性等多個維度上都有了大幅改善。

第三代ADCs的創(chuàng)新與突破(2019年至今): 2019年，Polivy和Enhertu的相繼上市標(biāo)志著第三代ADCs產(chǎn)品的出現(xiàn)。定點偶聯(lián)技術(shù)的采用使得藥物抗體比值(drug-antibody ratio，DAR)均一化，這也帶來了更少的脫靶毒性和更好的藥動學(xué)效率。同時，完全人源化抗體的使用可以進一步降低免疫原性。值得一提的是，2021年，榮昌生物公司的愛地希成為了中國首個原創(chuàng)ADCs產(chǎn)品獲得批準(zhǔn)上市。這也是我國首個同時獲得了美國FDA和中國國家藥品監(jiān)督管理局突破性療法認(rèn)定的ADCs產(chǎn)品。

1.2 ADCs產(chǎn)品的臨床試驗情況

截至2024年3月27日，在國際臨床試驗注冊平臺(http: //www. clinicaltrials. gov)上開展的與ADCs相關(guān)的臨床試驗共計281項(關(guān)鍵詞: antibody-drug conjugate)[10]。其中，美國以189項位居首位，中國以51項位居第2，歐盟和澳大利亞分別有15和7項。同時，我們統(tǒng)計了每年新增的ADCs臨床試驗數(shù)量(見圖2)。1995—2023年，新增的ADCs臨床試驗數(shù)量呈快速增長趨勢。在近10年(2014—2023年)中，新增的ADCs臨床試驗數(shù)量的年化增長率達(dá)到了13.43%。

如表2所示，按照適應(yīng)證進行排序，研究頻次排名前5的分別是乳腺癌(59次)、實體瘤(51次)、淋巴瘤(42次)、卵巢癌(18次)及白血病(18次)，其余主要為其他類型癌癥。此外，ADCs的臨床研究也在拓寬適應(yīng)證類型，包括輕鏈淀粉樣變性(light chain amyloidosis)、彌漫性皮膚系統(tǒng)性硬化癥(dif fuse cutaneous systemic Sclerosis)和大動脈炎(taka yasu arteritis)等。目前，ADCs的臨床研究主要集中在早期階段，但已有多項臨床研究進入了Ⅲ期(36項)或Ⅳ期(1項)臨床研究。

2 國內(nèi)外對ADCs產(chǎn)品的監(jiān)管情況

不斷攀升的ADCs產(chǎn)品的臨床試驗申請數(shù)量以及ADCs固有的大分子與小分子結(jié)合的復(fù)雜模式給監(jiān)管帶來了更多挑戰(zhàn)，在ADCs產(chǎn)品的設(shè)計過程中，需要對裸抗、連接子、有效載荷進行選擇并合理組合，不斷優(yōu)化偶聯(lián)方式與偶聯(lián)位點，不同的ADCs產(chǎn)品呈現(xiàn)出巨大的差異，這就導(dǎo)致了其生產(chǎn)工藝及質(zhì)量屬性具有個性化的特點，也使質(zhì)量控制成為了研發(fā)的重點和難點，因此業(yè)界亟需更為科學(xué)與全面的監(jiān)管體系來規(guī)范ADCs產(chǎn)品的研發(fā)與生產(chǎn)。

2.1 我國對ADCs產(chǎn)品的監(jiān)管情況

目前，我國針對ADCs產(chǎn)品發(fā)布了《抗體偶聯(lián)藥物藥學(xué)研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則》《抗體偶聯(lián)藥物非臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》及《抗腫瘤抗體偶聯(lián)藥物臨床研發(fā)技術(shù)指導(dǎo)原則》，提出了ADCs開發(fā)過程中對靶抗原、抗體、連接子、有效載荷、原液、制劑的不同考量及關(guān)注要點。其中，藥學(xué)研究方面，有效載荷-連接子部分的質(zhì)量控制可參考化學(xué)藥物相關(guān)指導(dǎo)原則，如《化學(xué)藥物原料藥制備和結(jié)構(gòu)確證研究技術(shù)指導(dǎo)原則》《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》《化學(xué)藥物殘留溶劑研究技術(shù)指導(dǎo)原則》《化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過程技術(shù)指導(dǎo)原則》《手性藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則》以及ICH等相關(guān)指導(dǎo)原則; 裸抗部分的質(zhì)量控制可參考《中華人民共和國藥典》及相關(guān)指導(dǎo)原則，如《人用單克隆抗體質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則》、ICH等; ADCs原液及制劑則應(yīng)關(guān)注偶聯(lián)引起的關(guān)鍵質(zhì)量屬性的控制。

2.2 美國對ADCs產(chǎn)品的監(jiān)管情況

美國FDA發(fā)布了ADCs藥物的臨床藥理行業(yè)指南“Clinical Pharmacology Considerations for Anti body-Drug Conjugates Guidance for Industry”，但尚無藥學(xué)方面的指導(dǎo)原則，目前抗體、原液和制劑可參考生物制劑相關(guān)指南，有效載荷及連接子可參考對小分子化學(xué)藥的要求。在美國，ADCs產(chǎn)品的藥學(xué)審評涉及生物制品辦公室(Office of Biological Prod ucts，OBP)和新藥質(zhì)量評價辦公室(Office of New Drug Quality Assessment，ONDQA) 2個部門，其中，OBP負(fù)責(zé)ADCs抗體的審評，ONDQA負(fù)責(zé)有效載荷及連接子的審評，最終由OBP和ONDQA共同完成原液和制劑的審評。

3 ADCs產(chǎn)品的藥學(xué)研究關(guān)注點

3.1 裸抗部分

3.1.1 上游構(gòu)建方面

上游構(gòu)建是保障ADCs產(chǎn)品質(zhì)量與安全性的首要環(huán)節(jié)。首先，應(yīng)明確目的基因的來源及序列信息，并對目的基因序列進行優(yōu)化以提升蛋白質(zhì)的表達(dá)和功能。目的基因合成和構(gòu)建后，通過測序方法進行驗證，確保其與預(yù)期一致。其次，需關(guān)注宿主細(xì)胞的來源、特性，并確保其經(jīng)過適當(dāng)?shù)臒o血清馴化。表達(dá)載體的設(shè)計和構(gòu)建是實現(xiàn)目的基因高效表達(dá)的核心，需確保所選用的功能元件能夠促進目的基因在宿主細(xì)胞中的高效表達(dá)，并通過測序等方法驗證表達(dá)載體序列與理論序列一致。

此外，應(yīng)關(guān)注細(xì)胞庫的建立和穩(wěn)定性，如主細(xì)胞庫(MCB)、工作細(xì)胞庫(WCB)以及生產(chǎn)終末細(xì)胞庫(EOPC)的建立過程，包括凍存條件、密度、體積、數(shù)量和批號等信息，并開展細(xì)胞庫的穩(wěn)定性研究，評估其在傳代和貯存過程中的生長穩(wěn)定性、表達(dá)穩(wěn)定性、遺傳穩(wěn)定性。根據(jù)《中華人民共和國藥典》2020年版要求，對細(xì)胞庫開展全面的檢定，包括細(xì)胞鑒別、微生物檢測、內(nèi)外源病毒因子檢測、逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測等，以確保最終產(chǎn)品的安全性。生產(chǎn)工藝的模擬和優(yōu)化有助于確保產(chǎn)品在商業(yè)化生產(chǎn)中的穩(wěn)定性和一致性，藥學(xué)研究應(yīng)根據(jù)穩(wěn)定性研究結(jié)果(細(xì)胞生長、蛋白表達(dá)、遺傳穩(wěn)定性及病毒安全性)優(yōu)化生產(chǎn)工藝，并合理擬定限傳代次。此外，由于單克隆細(xì)胞株的篩選和評估是確保生物制品一致性的關(guān)鍵，應(yīng)通過科學(xué)的方法篩選出合適的細(xì)胞株，并評估其生產(chǎn)能力和產(chǎn)品質(zhì)量，同時采用多種方法進行單克隆性確認(rèn)。

3.1.2 生產(chǎn)用原材料方面

ADCs產(chǎn)品的生產(chǎn)過程涉及不同類型原材料的使用，原材料的來源與用途需被明確記錄和追蹤，以確保其質(zhì)量和供應(yīng)的連續(xù)性。同時，制定嚴(yán)格的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，包括對原材料的純度、活性、安全性等關(guān)鍵指標(biāo)進行質(zhì)控，并提供質(zhì)量分析證書(certificate of analysis，COA)，以滿足生產(chǎn)的具體要求。安全性檢測是另一個不可忽視的方面，特別是對于動物源性物料，必須進行牛海綿狀腦病(bovine spongiform encephalopathy，BSE)和傳染性海綿狀腦病(transmissible spongiform encephalopa thy，TSE)風(fēng)險評估，以確保原材料不會引入任何傳染性疾病的風(fēng)險。此外，對生產(chǎn)用原材料開展全面的風(fēng)險評估，建立和完善原材料分級管理體系，是確保原材料風(fēng)險可控的有效手段。

在原材料供應(yīng)鏈中，可能涉及原材料變更，這要求進行充分的評估和驗證工作，以確保新舊原材料的質(zhì)量和安全性相當(dāng)，甚至新采用的原材料更優(yōu)。對于企業(yè)自產(chǎn)的原材料，申請人需提供完整的藥學(xué)研究資料，包括生產(chǎn)工藝和質(zhì)控信息等。

3.1.3 裸抗生產(chǎn)工藝方面

裸抗生產(chǎn)工藝流程主要涉及上游細(xì)胞培養(yǎng)工藝的種子復(fù)蘇、逐級擴增、生產(chǎn)培養(yǎng)和收獲澄清等步驟以及下游純化工藝中的親和層析、離子交換層析和除病毒過濾等關(guān)鍵技術(shù)。通過對關(guān)鍵工藝步驟及其參數(shù)的控制，以確?？贵w中間體的質(zhì)量和純度。未處理收獲液檢測是評估產(chǎn)品微生物安全性的重要手段，需要對病毒、支原體、真菌和細(xì)菌等潛在污染物進行全面監(jiān)測。此外，病毒去除/滅活驗證是確保生物制品安全性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，要求涵蓋不同模式病毒，常見的如小鼠細(xì)小病毒(minute virus of mice，MVM)、異嗜性小鼠白血病病毒(xenotropic murine leukemia virus，X-MuLV)等; 并應(yīng)在最差條件下評估病毒的安全系數(shù)，以驗證生產(chǎn)工藝中病毒去除或滅活步驟的有效性。

在工藝穩(wěn)健性和批間一致性方面，通過持續(xù)的工藝優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析，可以提高生產(chǎn)過程的穩(wěn)定性，確保產(chǎn)品質(zhì)量的一致性。同時，工藝變更管理要求對任何工藝調(diào)整進行嚴(yán)格的評估和驗證，以保障變更后工藝的質(zhì)量和安全性。對于生產(chǎn)規(guī)模放大或生產(chǎn)場地轉(zhuǎn)移等情況，由于其可能會對產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生潛在影響，因此需要采取措施確保不同規(guī)模和場地下生產(chǎn)的產(chǎn)品均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。此外，如果涉及委托生產(chǎn)，應(yīng)加強對受托生產(chǎn)企業(yè)的審計和監(jiān)督，建立完善的質(zhì)量管理體系，保障臨床受試者的安全。

3.1.4 裸抗質(zhì)量研究方面

對于裸抗的質(zhì)量控制，涉及從分子結(jié)構(gòu)到生物學(xué)功能等諸多層面。首先，需確認(rèn)裸抗的一級結(jié)構(gòu)，即氨基酸序列，并通過高級結(jié)構(gòu)分析確保其正確折疊及功能，對于游離巰基和二硫鍵錯配情況需重點關(guān)注。其次，對裸抗的翻譯后修飾，如糖基化、磷酸化以及潛在的脫酰胺化或天冬氨酸異構(gòu)化等，進行深入分析，以保證其生物活性和穩(wěn)定性與預(yù)期相符。由于裸抗的糖基化發(fā)生在細(xì)胞培養(yǎng)階段，其修飾類型及水平可能受到下游純化影響，除非偶聯(lián)過程直接涉及到糖鏈，否則ADCs原液和制劑生產(chǎn)過程都不會影響糖基化。因此，重點控制裸抗的糖基化修飾[11]。生物學(xué)活性評估包括抗原結(jié)合活性、抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)和補體依賴的細(xì)胞毒性(complement dependent cyto toxicity，CDC)研究，是確保療效的重要環(huán)節(jié)。此外，純度和雜質(zhì)控制是保證裸抗安全性和有效性的關(guān)鍵，對于分子大小異質(zhì)體和電荷變異體，需關(guān)注其對于產(chǎn)品安全性和有效性的影響。工藝相關(guān)雜質(zhì)也應(yīng)進行限度控制，如蛋白質(zhì)A殘留、外源性DNA殘留、宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)殘留、消泡劑、胰島素和篩選劑等，以避免這些雜質(zhì)對產(chǎn)品安全性和有效性產(chǎn)生負(fù)面影響。裸抗下游純化的清除能力可減少外源性DNA殘留和宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)殘留，而ADCs原液和制劑的生產(chǎn)均不是這些雜質(zhì)的重要來源，因此在裸抗部分加以重點控制。對于可能存在的微生物安全問題，需對裸抗的微生物限度及細(xì)菌內(nèi)毒素含量進行控制。在此基礎(chǔ)上，制定和完善裸抗的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確立純度、雜質(zhì)、生物學(xué)活性等關(guān)鍵質(zhì)量屬性的標(biāo)準(zhǔn)限度，并通過積累多批次數(shù)據(jù)合理擬定各檢項標(biāo)準(zhǔn)限度的范圍。同時對分析方法進行初步的驗證，包括準(zhǔn)確性、精密度和專屬性等關(guān)鍵項目。

3.1.5 裸抗穩(wěn)定性研究方面

參照生物制品穩(wěn)定性研究的有關(guān)指導(dǎo)原則，對裸抗開展長期、加速穩(wěn)定性研究，以評估其在整個有效期內(nèi)的穩(wěn)定性表現(xiàn); 開展不同影響因素(如高溫、光照、振蕩、凍融、pH變化、氧化等)的穩(wěn)定性研究，為確定最佳儲存和運輸條件提供數(shù)據(jù)支持。同時，在檢項中應(yīng)增加微生物限度考察，確保裸抗在儲存過程中的微生物安全性。穩(wěn)定性研究結(jié)果應(yīng)能支持Ⅰ期臨床試驗。

3.2 有效載荷-連接子部分

有效載荷指的是藥物到達(dá)腫瘤細(xì)胞、腫瘤微環(huán)境或其他靶細(xì)胞后發(fā)揮作用的小分子，目前最常見的是小分子細(xì)胞毒性藥物; 而連接子指的是使裸抗與有效載荷穩(wěn)定連接的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

生產(chǎn)工藝方面，要重點關(guān)注起始物料的選擇和生產(chǎn)工藝，基于ICH Q11指南的要求，對于起始物料和中間體加強質(zhì)量控制，減少潛在雜質(zhì)的引入[12]。

結(jié)構(gòu)確證方面，應(yīng)采用各種分析技術(shù)(如核磁共振、質(zhì)譜、紅外光譜等)確證有效載荷和連接子的化學(xué)結(jié)構(gòu)，包括平面結(jié)構(gòu)和立體構(gòu)型。

質(zhì)量研究方面，深入分析生產(chǎn)過程中可能產(chǎn)生的雜質(zhì)，包括有機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)、元素雜質(zhì)、基因毒性雜質(zhì)、降解雜質(zhì)、殘留溶劑等，參考ICH Q3指南的要求，并制定合理的雜質(zhì)限度。對于含有手性中心的化合物，需重點關(guān)注手性雜質(zhì)的研究和控制; 對于可與抗體偶聯(lián)的各種衍生雜質(zhì)，關(guān)注檢查方法的專屬性，保證擬定方法對各種潛在雜質(zhì)可有效分離、檢出。對于實際檢出量較高的雜質(zhì)進行結(jié)構(gòu)鑒定，必要時作為特定雜質(zhì)訂入各質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)?？傊s質(zhì)含量應(yīng)控制在藥理毒理研究的安全范圍內(nèi)。確保有效載荷和連接子的質(zhì)量滿足臨床研究標(biāo)準(zhǔn)也至關(guān)重要，包括對外觀、純度、有關(guān)物質(zhì)(特定和非特定雜質(zhì))、殘留溶劑、水分和含量等方面的嚴(yán)格質(zhì)量控制。同時，還需建立和完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并通過方法學(xué)驗證以確保檢測的準(zhǔn)確性和可靠性。此外，連接子與裸抗中的某些殘基反應(yīng)形成共價鍵的能力理應(yīng)得到重視。

對有效載荷和連接子也應(yīng)開展穩(wěn)定性研究，以確保最佳的儲存條件和有效期，穩(wěn)定性研究結(jié)果應(yīng)支持臨床試驗期間的研究。在臨床研究過程中，根據(jù)技術(shù)要求和工藝認(rèn)知的深入，要不斷優(yōu)化生產(chǎn)工藝，并進行批量放大研究和驗證，以滿足臨床試驗和后續(xù)商業(yè)化生產(chǎn)的需求。需要注意的是，用于臨床的有效載荷-連接子樣品的生產(chǎn)應(yīng)在符合GMP條件下制備。

3.3 ADCs原液和制劑部分

3.3.1 ADCs原液和制劑生產(chǎn)工藝方面

ADCs原液和制劑的生產(chǎn)工藝與裸抗的生產(chǎn)工藝相比，有諸多方面的差異。首先，ADCs原液需對偶聯(lián)工藝進行重點關(guān)注，研究偶聯(lián)反應(yīng)的條件，如抗體濃度、還原劑與抗體的摩爾比、連接子-載荷與抗體的摩爾比、pH值、還原時間、偶聯(lián)時間等，以確保有效載荷連接子與抗體的有效偶聯(lián)。同時在中間體和關(guān)鍵質(zhì)量屬性控制環(huán)節(jié)，ADCs原液需對DAR值、游離小分子藥物含量等進行監(jiān)控，這些是評估偶聯(lián)效率和產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。對于ADCs原液和制劑來說，還需要額外關(guān)注工藝相關(guān)雜質(zhì)，如小分子藥物殘留、連接子殘留、溶劑殘留等，并進行相應(yīng)的去除和安全性評估。同時，ADCs制劑需要進行處方開發(fā)，包括輔料的選擇和使用，確保輔料的質(zhì)量和安全性，考慮輔料與小分子藥物的相容性以及輔料對ADCs制劑穩(wěn)定性的影響。在工藝驗證研究方面，無菌工藝模擬也應(yīng)被納入開展。

對于工藝穩(wěn)健性、批間一致性、工藝變更管理、生產(chǎn)規(guī)模及轉(zhuǎn)移和委托生產(chǎn)管理的要求，則與裸抗部分保持嚴(yán)格的一貫要求，確保產(chǎn)品的質(zhì)量一致性和臨床安全性。在ADCs藥物開發(fā)中，經(jīng)常涉及不同類型的變更，如原材料或中間體供應(yīng)商變動、處方工藝調(diào)整、生產(chǎn)規(guī)模擴大、生產(chǎn)場地更迭以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更新等。多數(shù)變更應(yīng)根據(jù)風(fēng)險評估的基本原則，并參照ICH Q5E等相關(guān)指南，通過開展可比性研究來確認(rèn)其影響，尤其重視變更前后關(guān)鍵質(zhì)量屬性的差異[12]。對于臨床試驗期間發(fā)生的重大變更，申請人應(yīng)主動及時地與監(jiān)管機構(gòu)進行溝通交流。

3.3.2 ADCs原液和制劑質(zhì)量研究方面

在結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)表征模塊，除了一級結(jié)構(gòu)、高級結(jié)構(gòu)、翻譯后修飾、生物學(xué)活性、純度和雜質(zhì)、微生物安全這些裸抗常規(guī)的關(guān)注點外，對于ADCs原液還需額外關(guān)注偶聯(lián)位點、DAR值、藥物載藥量分布等。其中藥物載藥量分布環(huán)節(jié)，由于賴氨酸偶聯(lián)、半胱氨酸偶聯(lián)及位點特異性偶聯(lián)等偶聯(lián)技術(shù)所形成的DAR值分布有明顯差異，應(yīng)加以區(qū)分。此外，對于產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)，應(yīng)開展對于未偶聯(lián)裸抗、雜質(zhì)偶聯(lián)ADCs、空載連接子、游離小分子、有效載荷-連接子中間體等的檢測; 對于工藝相關(guān)雜質(zhì)，要額外開展還原劑殘留、偶聯(lián)試劑/酶殘留、有機溶劑殘留等檢測。

對于ADCs原液和制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其限度的制定，除了考慮抗體類產(chǎn)品的常規(guī)檢測項外，還需將DAR值、藥物載藥量分布、未偶聯(lián)抗體含量、游離小分子含量等納入檢測項。臨床試驗期間要持續(xù)完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，同時積累多批次數(shù)據(jù)合理擬定各檢項標(biāo)準(zhǔn)限度范圍。

關(guān)于ADCs對照品，需關(guān)注ADCs對照品的詳細(xì)來源、標(biāo)定研究、驗收標(biāo)準(zhǔn)、檢測報告、穩(wěn)定性研究結(jié)果，如使用多批次對照品，要關(guān)注其可溯源性。

3.3.3 ADCs原液和制劑穩(wěn)定性研究方面

參照生物制品穩(wěn)定性研究的有關(guān)指導(dǎo)原則，對ADCs原液和制劑開展長期、加速穩(wěn)定性研究，并根據(jù)情況有選擇性地開展影響因素研究，以評估其在整個有效期內(nèi)的穩(wěn)定性表現(xiàn)。在穩(wěn)定性考察項目中，ADCs原液除了裸抗穩(wěn)定性研究包含的考察項目，還應(yīng)特別關(guān)注偶聯(lián)所產(chǎn)生的穩(wěn)定性問題，如DAR值的變化、新的產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)等。由于偶聯(lián)過程中引入了化學(xué)結(jié)構(gòu)，ADCs原液通常對光照和溫度更為敏感，應(yīng)加以重視; 同時，ADCs原液和制劑的降解途徑可能與裸抗不同，需特別關(guān)注由于偶聯(lián)產(chǎn)生的新降解產(chǎn)物和降解途徑。

對于ADCs制劑需開展使用穩(wěn)定性研究，模擬臨床使用條件，評估ADCs制劑在稀釋、配伍、輸注等過程中的穩(wěn)定性，確保產(chǎn)品在臨床使用過程中保持其療效和安全性。臨床研究用樣品的保存、運輸和使用均應(yīng)有穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)的支持。

3.3.4 內(nèi)包材方面

裸抗、ADCs原液和制劑所使用的包裝材料，需確保來源明確并符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括對供應(yīng)商的嚴(yán)格評估和對包材類型、材質(zhì)、規(guī)格的信息收集。其次，開展初步的包材相容性研究，評估其化學(xué)惰性、物理穩(wěn)定性和生物相容性，以確保包材不會影響產(chǎn)品的穩(wěn)定性，同時防止產(chǎn)品成分從包材中遷移。

3.4 藥學(xué)研究變更方面

在ADCs的開發(fā)過程中，常涉及生產(chǎn)用原材料的變更、處方工藝的調(diào)整、生產(chǎn)規(guī)模的擴大、生產(chǎn)場地的轉(zhuǎn)移以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的更新等。面對這些變更，開展可比性研究是至關(guān)重要的?？杀刃匝芯繎?yīng)以風(fēng)險評估為基礎(chǔ)，并遵循ICH Q5E等相關(guān)指南的要求，重點監(jiān)測變更前后關(guān)鍵質(zhì)量屬性的波動。由于ADCs自身的復(fù)雜性，制定和實施變更應(yīng)更加審慎。如上游生產(chǎn)工藝的變更所造成的裸抗、有效載荷的質(zhì)量屬性差異，這些差異是否會對后續(xù)的偶聯(lián)工藝或ADCs的關(guān)鍵質(zhì)量屬性造成不利影響。此外，在臨床研究開展過程中，任何重大變更應(yīng)及時與監(jiān)管機構(gòu)進行溝通和交流，確保變更的透明性和科學(xué)性，從而保障ADCs的安全性和有效性。

4 結(jié)語

隨著ADCs在腫瘤治療領(lǐng)域的快速發(fā)展，其獨特的作用機制和廣闊的應(yīng)用前景受到了廣泛關(guān)注[13]。本文綜述了ADCs的研發(fā)歷程、國內(nèi)外上市情況、臨床申報現(xiàn)狀以及監(jiān)管法規(guī)，并重點探討了IND階段藥學(xué)研究的關(guān)注點。在IND階段，藥學(xué)研究的核心在于確保ADCs產(chǎn)品的安全性。從裸抗的選擇和生產(chǎn)、連接子和有效載荷的設(shè)計到ADCs的生產(chǎn)過程和質(zhì)量控制，每一步都需嚴(yán)格把關(guān)。我們期待通過不斷的技術(shù)創(chuàng)新和深入研究使ADCs產(chǎn)品能夠為患者帶來更多的治療選擇。同時，監(jiān)管機構(gòu)和科研人員應(yīng)通力合作，確保這類創(chuàng)新藥物的安全性和有效性，讓更多患者受益于這一革命性的治療手段。

參考文獻(xiàn)

詳見《中國新藥雜志》 2025年 第34卷第1期