CAR-T，即嵌合抗原受體-T細胞（Chimeric Antigen Receptor T-cell），其中CAR是一種人工構建的細胞表面受體，由能夠識別腫瘤抗原的胞外單鏈抗體可變區(qū)和胞內(nèi)信號傳導區(qū)域組成。T細胞過表達CAR分子后，能識別癌細胞表面的腫瘤抗原并被激活，從而特異性殺傷腫瘤細胞。

CAR-T產(chǎn)品治療過程

　　自從2017年8月首個CAR-T細胞產(chǎn)品Kymriah獲FDA批準上市以來，這一療法在短短數(shù)年間進行了多次迭代。

      然而，當前的CAR-T產(chǎn)品，無論是自體還是通用型，均是體外CAR-T療法（ex vivo CAR-T），需要從患者身上收集細胞，并在體外對這些細胞進行改造及培養(yǎng)，最后再將CAR-T細胞重新回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，因此面臨生產(chǎn)、運輸、安全挑戰(zhàn)、價格高昂等多重挑戰(zhàn)。在這種背景下，如何使CAR-T療法變得更完美，成為藥企的主旋律。近日，阿斯利康一筆高達10億美元的交易，使得體內(nèi)CAR-T療法（in vivo CAR-T）再次被點燃。

　　110億美元,阿斯利康豪賭體內(nèi)CAR-T

      3月17日，阿斯利康宣布，以總對價10億美元（約72.4億元人民幣）收購比利時生物技術公司EsoBiotec，創(chuàng)下本年度細胞與基因治療（CGT）領域最高收購金額。EsoBiotec成立于2020年，是專注于體內(nèi)CAR-T領域的新銳公司。其獨有的工程納米抗體慢病毒（ENaBL）平臺，為癌癥治療領域帶來了創(chuàng)新性突破。ENaBL以具備免疫屏蔽特性的慢病毒作為載體，這類載體能有效抵御免疫系統(tǒng)攻擊，確保將遺傳指令精準傳遞至T細胞，從而在體內(nèi)高效地將T淋巴細胞重編程為特定功能細胞。

      依托ENaBL平臺，EsoBiotec已布局四條臨床候選管線，其中針對多發(fā)性骨髓瘤的候選管線ESO-T01（BCMA CAR-T）已進入臨床研究階段。ESO-T01可精準識別并緊密結合表達BCMA的腫瘤細胞，激活免疫反應以殺傷腫瘤，展現(xiàn)出極高的精度與效力。此次收購完成后，EsoBiotec將成為阿斯利康的全資子公司，在比利時開展業(yè)務。

      在收購EsoBiotec之前，阿斯利康于2023年底，更是豪擲12億美元收購亙喜生物。亙喜生物針對CAR-T行業(yè)的諸多瓶頸，開發(fā)出了FasTCAR次日生產(chǎn)技術平臺，該平臺可將傳統(tǒng)工藝長達數(shù)周的生產(chǎn)周期大幅縮減至次日，并且能夠強化T細胞健康狀態(tài)，以及節(jié)省治療費用等，有望為CAR-T細胞療法的生產(chǎn)及臨床應用帶來重要變革。2022年，F(xiàn)asTCAR自體CAR-T技術平臺被正式評選為2022年Fierce Life Sciences年度創(chuàng)新獎之“生物技術創(chuàng)新獎”。

      亙喜生物基于FasTCAR平臺打造的BCMA/CD19雙靶點CAR-T療法GC012F備受關注，也是吸引阿斯利康收購的重要因素。GC012F可同時靶向B細胞成熟抗原（BCMA）和CD19雙靶點，目前研究者已發(fā)起多項臨床試驗，包括評估其治療復發(fā)/難治性多發(fā)性骨髓瘤（RRMM）、初診多發(fā)性骨髓瘤（NDMM）以及B細胞非霍奇金淋巴瘤的安全性和有效性等，另外還在中美兩地獲批用于治療難治性系統(tǒng)性紅斑狼瘡適應癥的臨床試驗。

      除了外部BD獲得的CAR-T產(chǎn)品外，阿斯利康還自研或合作開發(fā)了CAR-T產(chǎn)品AZD7003（靶向GPC3）、AZD0754（靶向Steap2）和AZD6422（靶向Claudin18.2）。雖然阿斯利康在CAR-T賽道入局并不算早，但其正在用實際行動展示押注下一代CAR-T技術的決心。那么，關于阿斯利康押注的體內(nèi)CAR-T技術，目前研發(fā)進展如何？

　　改變游戲規(guī)則的體內(nèi)CAR-T,多家藥企競逐

      體內(nèi)CAR-T是指通過保護性載體，將嵌合抗原受體（CAR）分子載送至患者T細胞內(nèi)，并讓這些T細胞在體內(nèi)自動轉化為CAR-T細胞。與傳統(tǒng)CAR-T療法相比，體內(nèi)CAR-T不需要從患者體內(nèi)提取CAR-T細胞，也不需要提前進行淋巴細胞清除的預處理，不僅整個治療等待時間更少，而且無需專門的定制化處理。

      在安全性上，由于CAR-T細胞來自患者自身，大幅降低了“通用型CAR-T”常見的細胞因子釋放綜合征等發(fā)生風險。

      鑒于一系列優(yōu)勢，體內(nèi)CAR-T可能會改變?nèi)蚴袌龅挠螒蛞?guī)則，吸引了MNC和Biotech競相布局。由于體內(nèi)CAR-T是通過不同的手段直接在體內(nèi)進行基因修改，因此如何將編碼CAR的基因或mRNA精準高效地遞送至患者體內(nèi)的T細胞，并且不影響其他細胞，是該技術開發(fā)的關鍵。

      目前，常用的遞送系統(tǒng)包括病毒載體、mRNA遞送系統(tǒng)（LNP）以及基因編輯技術，以前兩種為主。目前，以病毒載體為遞送手段的代表公司有Interius BioTherapeutics、Umoja Biopharma和Kelonia Therapeutics等。Interius BioTherapeutics（以下簡稱“Interius”）是全球體內(nèi)CAR-T研發(fā)進度最快的公司之一。

      去年7月，公司在研體內(nèi)CAR-T療法INT2104宣布獲澳大利亞治療用品管理局（TGA）批準進入臨床試驗，用于治療B細胞惡性腫瘤。INT2104是一種慢病毒載體基因療法，設計靶向CD7陽性的T細胞和NK細胞，并傳遞CAR轉基因，以在體內(nèi)生成效應CAR-T和CAR-NK細胞。這些CAR細胞靶向CD20陽性B細胞，用于治療B細胞惡性腫瘤。據(jù)悉，INT2104是首個進入人體臨床試驗的體內(nèi)CAR-T療法。

      INT2104設計示意圖

　　Umoja Biopharma（簡稱Umoja）擁有四大核心技術平臺：VivoVec采用專有的第三代慢病毒載體技術，可使人體自行制造CAR-T細胞；RACR/CAR能夠對體內(nèi)細胞進行編程，促進體內(nèi)產(chǎn)生的CAR-T細胞長期存活和擴張；iCIL利用RACR技術從誘導的多能干細胞中大規(guī)模生產(chǎn)合成抗癌細胞，增強內(nèi)源性抗腫瘤免疫功能；TumorTag通過將通用CAR與離體制造的細胞結合，提高了靶向靈活性。

VivoVec平臺作用機制

　　Umoja基于VivoVec平臺，研發(fā)了體內(nèi)CAR-T療法UB-VV111（靶向CD19），該產(chǎn)品已在去年7月底獲FDA批準，進入臨床試驗，用于血液瘤治療。

      在此之前，艾伯維已和Umoja達成獨家合作協(xié)議，以使用Umoja專有的VivoVec平臺開發(fā)CAR-T細胞療法候選藥物。該交易總金額高達14.4億美元。Kelonia Therapeutics（簡稱Kelonia）對傳統(tǒng)的慢病毒載體（LVV）進行了修飾，其iGPS技術建立在LVV的基礎上，在病毒包膜上采用了獨特定義iGPS粒子特異性的靶向分子和優(yōu)化的融合蛋白（fusogen）設計，在目標免疫細胞識別出LVV表面特殊抗原并與之結合后，促融合分子才會對免疫細胞進行轉導，進行基因遞送，提高了基因遞送的精確性和高效性。

      2024年2月，安斯泰來與Kelonia達成合作協(xié)議，將利用Kelonia的iGPS技術，來開發(fā)針對至多兩個項目的創(chuàng)新體內(nèi)CAR-T細胞療法。目前在研CAR-T產(chǎn)品大多采用病毒載體，雖然這可使疾病獲得長期緩解，但病毒載體具有制作成本高以及致癌風險等，因此，在體內(nèi)CAR-T研發(fā)中，非病毒載體的技術突破已成為關鍵。目前非病毒載體主要代表是脂質納米顆粒（LNP），其具有可大量生產(chǎn)、免疫原性低的優(yōu)點，而且不插入基因組因而避免了基因突變風險。

       LNP技術曾在新冠疫苗中大放異彩，而今被迅速應用到CAR-T領域。Capstan Therapeutics公司開發(fā)了抗體偶聯(lián)的LNP（Cellscope平臺），利用特異性的抗CD8抗體修飾，將載有CAR mRNA的脂質納米顆粒靶向遞送至T細胞。

      這種策略能在體內(nèi)快速將患者的T細胞轉化成為CAR-T細胞。Capstan因此被行業(yè)媒體Endpoints News評為“2024生物醫(yī)藥最 具潛力新銳”。2024年3月，Capstan完成了1.75億美元的B輪融資，投資者陣容豪華，強生、BMS、禮來、拜耳、諾華、輝瑞等制藥巨頭均現(xiàn)身。除Capstan外，Myeloid Therapeutics、Orbital和Orna等公司均利用LNP遞送RNA技術，以誘導靶細胞中CAR表達的短暫激增。目前全球已有多個體內(nèi)CAR-T候選產(chǎn)品已經(jīng)或即將進入臨床。

　　關于CAR-T治療我們在追求什么？

      CAR-T技術從開發(fā)至今經(jīng)歷了數(shù)次迭代，對于CAR-T治療，行業(yè)一直在追求極 致的路上。

      對于體外CAR-T來說，如何縮短生產(chǎn)時間，簡化制備過程，降低高昂的成本、物流費用等是藥企亟需解決的問題。

      另外，對于一些T細胞質量或數(shù)量較差的患者，體外改造可能并不適用。對于體內(nèi)CAR-T來說，如何提高載體的安全性依然是面臨的主要挑戰(zhàn)，其次是如何在治療窗口期內(nèi)確保足夠的表達和免疫激活。除此之外，由于體內(nèi)環(huán)境復雜，如何在體內(nèi)生成并維持具有長期持久性的CAR-T細胞群體，也是體內(nèi)CAR-T面臨的一個重要挑戰(zhàn)。

      無論對于體外還是體內(nèi)CAR-T，目前主要陣地仍是血液瘤，下一步，適應癥拓展是關鍵，如實體瘤、自免等其他未滿足大量需求的適應癥。

      總之，CAR-T技術融合了基因編輯、載體工程、分子靶向等多方面尖端技術。誠然，和所有革命性發(fā)明一樣，CAR-T藥物并不完美，至今也仍然在持續(xù)優(yōu)化的道路上。通過不斷優(yōu)化遞送工具和靶向策略，藥企正逐步攻克CAR-T療法的技術壁壘。隨著這些創(chuàng)新的積累，有望掀開細胞治療的新篇章。